更新時(shí)間:2021-07-19
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樣品收集、處理及保存方法:
1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原的試管,收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。
血清跟血漿的本質(zhì)區別:
A 血 漿:離開(kāi)血管的全血經(jīng)抗凝處理后,通過(guò)離心沉淀,所獲得的不含細胞成分的液體,即血漿
B 血 清:離體的血液凝固之后,jing血凝塊聚縮釋出的液體,即血清,粗略的說(shuō)
C 血清與血漿的區別 = 主要在于血清不含纖維蛋白元
利用交叉實(shí)驗辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
R1、取出購買(mǎi)的A的包被板兩條。
R2、一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線(xiàn)。
R3、另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線(xiàn)。
R4、后續操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
R5、實(shí)驗完畢后,檢測兩條標準曲線(xiàn),如果兩條標準曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
R6、小鼠β淀粉樣蛋白1-42Aβ1-42ELISA試劑盒如果兩條標準曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
結果判斷與分析:
1) 儀器值:于波長(cháng)450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。
2) 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的GHR標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線(xiàn),樣品的GHR含量可根據其OD值由標準曲線(xiàn)換算出相應的濃度。
3) 檢測值范圍:0-80ng/ml
4) 敏感度: 0.1 ng/ml
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