重要提示
采用EnvirusTM-AdV增強后，感染時(shí)的細胞融合度對感染效果有影響，建議細胞融合度在30-50%左右時(shí)進(jìn)行感染實(shí)驗。確定了細胞量以后，建議采用倍比稀釋的方法，用不同量的腺病毒（MOI值：1－1000pfu/cell）進(jìn)行實(shí)驗以確定的腺病毒用量。EnvirusTM-AdV和病毒的稀釋液采用和細胞基礎培養基一致的無(wú)血清液體，如無(wú)血清DMEM或1640。
 

實(shí)驗過(guò)程（以24孔板感染為例）
提前一天將細胞種植在24孔板中，以感染時(shí)細胞融合度在30-50%左右為宜(懸浮細胞根據需要調整，不要采用過(guò)高的細胞密度)。將4ul的EnvirusTM-AdV用25μl無(wú)血清稀釋液稀釋?zhuān)浞只靹?，制成EnvirusTM-AdV稀釋液。4℃靜置5分鐘。將適量病毒原液或稀釋液與EnvirusTM-AdV稀釋液輕柔混勻，4℃靜置15分鐘。
注：如采用病毒原液直接混合出現沉淀，建議用與⑴等量同樣的無(wú)血清稀釋液稀釋病毒。
 

將上述混合液加入到含*培養基的細胞上，37℃培養8小時(shí)后觀(guān)察細胞狀態(tài)，如沒(méi)有明顯變化，不要更換培養基，繼續培養。由于腺病毒感染較快，可分別在12，24，48小時(shí)觀(guān)察表達情況。
注：適當減少感染時(shí)的細胞培養基量可以增加感染效率，但也可能增加細胞毒性。如出現細胞毒性可增加培養基量或更換培養基。