原理
ELISA試劑盒其根本原理可概括為：將特異的抗原-抗體免疫學(xué)反應和酶學(xué)催化反應相聯(lián)絡(luò )，以酶促反應的擴展作用來(lái)顯現初級免疫學(xué)反應。因而，酶免疫技術(shù)一般均有兩部分構成，即一次或數次免疫學(xué)反應和一次酶促反應?？乖?、抗體發(fā)生特異聯(lián)絡(luò )進(jìn)程中，設法引入酶聯(lián)絡(luò )物，如酶符號的抗抗體，然后參與酶的底物，在酶催化下生成有色商品，反映出被測定抗原或抗體的量。
操作流程、類(lèi)型及特征
操作流程：
檢查抗體多用直接型elisa。以純化抗原包被載體，經(jīng)4℃過(guò)夜，以無(wú)關(guān)蛋白封閉起碼2小時(shí)以上，參與待測樣品，室溫孵育1小時(shí)，洗刷潔凈后加酶標抗體，再經(jīng)室溫孵育、洗刷后，以底物顯色，顯色到必定程度停止反應，在酶標儀上讀效果或以肉眼區分。
類(lèi)型：ELISA試劑盒具體方法的類(lèi)型繁復，試劑的標準化疑問(wèn)還未終究處理，溫育的時(shí)間、溫度、洗刷液的種類(lèi)及洗刷次數等都是影響測定的要素。但參看以上根本進(jìn)程，無(wú)論怎樣改變，均離不開(kāi)抗原-抗體反應、酶標抗體的免疫學(xué)反應及酶催化作用。
特征：1、敏感性高，可檢出濃度在ug~mg/ml水平；2、特異性強；3、重復性好；4、敏捷、簡(jiǎn)練、便宜。
試驗條件
固相載體：可作為固相載體的物質(zhì)很多，如：纖維素、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚丙烯、交聯(lián)葡聚糖、玻璃、硅橡膠、瓊脂糖凝膠等?？梢愿鞣N形式出現；試管、微量反應板凹孔、小珠.....。zui常用的是聚苯乙烯成品，其吸附性zui棒。固相包被的機制一般不外乎物理吸贊同共價(jià)交聯(lián)，
封閉：以無(wú)關(guān)蛋白占有載體上未被包被的空位，常用的封閉液是1%牛血清白蛋白或10%小牛血清。
待測樣品：稀釋度要適合，濃度太大會(huì )發(fā)生非特異性吸附構成假陽(yáng)性，過(guò)火稀釋會(huì )影響抗原-抗體之間的免疫學(xué)反應。選擇zui適稀釋度，在試驗體系中取光密度在1.0支配的稀釋度為宜。
酶聯(lián)絡(luò )物：運用高質(zhì)量的酶聯(lián)絡(luò )物是elisa成功的關(guān)鍵。
注意事項
ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫技術(shù)的試劑標準化疑問(wèn)沒(méi)有*處理，溫育進(jìn)程的時(shí)間、溫度、洗刷液的種類(lèi)及洗刷次數都是影響終究測定的要素。為使試驗得到滿(mǎn)足的效果，在操作進(jìn)程中應作到
1、每次試驗都必須設陽(yáng)性和陰性對照。
2、封閉要*。
3、洗刷要測定。