在ELISA試劑盒檢測實(shí)驗中,包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,做重組蛋白時(shí),要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。但有時(shí)因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。
操作技巧:
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
3.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
4.要盡量做雙孔實(shí)驗,這樣才既能保證數據的準確性,ELISA試劑盒又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒實(shí)驗中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作。防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗*。
9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
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