對于科研人員來(lái)說(shuō)小鼠ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，操作過(guò)程中夾雜著(zhù)洗滌和封閉步驟。然而，即使是平淡無(wú)奇的洗滌和封閉，如果操作不合理，也會(huì )很大程度上影響實(shí)驗的準確度。實(shí)驗結束時(shí)我們是否能獲得有意義而且準確的信息，這在很大程度上取決于操作結果的正確與否。
小鼠ELISA試劑盒使用方法：
1、血清：操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
在做小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗時(shí)洗滌很重要：
洗滌步驟看似很簡(jiǎn)單無(wú)聊，其實(shí)很重要，因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，就會(huì )增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì )阻止非特異結合反應。如果背景過(guò)高，ELISA試劑盒懷疑洗滌不夠，可以嘗試增加洗滌次數。