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                              ELISA試劑盒使用方法講解
                              更新時(shí)間:2015-11-23   點(diǎn)擊次數:877次

                                  公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒敏感性高,特異性強,重復性好。試劑盒中試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中,檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
                              ELISA試劑盒使用方法一
                              雙抗體夾心法
                              1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
                              2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽(yáng)性對照孔)。
                              3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
                              4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
                              5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
                              6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀(guān)察結果:反應孔內顏色越深,陽(yáng)性程度越強,陰性反應為無(wú)色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
                              ELISA試劑盒使用方法二
                              間接法
                              1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜;
                              2.次日洗滌3次;
                              3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;
                              4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
                              5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
                              6.’zui后一遍用DDW洗滌。
                              其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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                              主營(yíng)產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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