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                              ELISA檢測試劑盒的操作秘訣賞析
                              更新時(shí)間:2015-06-16   點(diǎn)擊次數:922次

                                  得到了不少客戶(hù)的反應支持。昨日下午,我公司李收到了技術(shù)部門(mén)歐陽(yáng)總監發(fā)來(lái)的技術(shù)研究,在這里分享給各位朋友們參考學(xué)習,下面一起來(lái)看看很多人都不知道的ELISA檢測試劑盒操作秘訣賞析!
                                  有2種方法來(lái)檢驗試驗的度:通常用變異系數來(lái)表示,①幾個(gè)樣品用ELISA法同時(shí)進(jìn)行多次測定求出CV%;②不同時(shí)間對不同操作者對某幾個(gè)樣進(jìn)行多次測定求出變異系數。CV是個(gè)體參數標準差與平均數的比率。
                                   不論目測或分光光度計測定,均可作一個(gè)稀釋度或一系列稀釋度測定,一般常規診斷只用一個(gè)稀釋度判斷陽(yáng)性或陰性就可以了,這樣比較方便,現在推薦傳染病的血清診斷用1:200一個(gè)稀釋度。有些需要定量的,可作一系列稀釋度測定。記錄結果有下列幾種方法:
                                  1.“+"或“-":所有超過(guò)規定的OD值(如OD,0.4)的標本均屬陽(yáng)性,此規定OD值是根據事先測定大量陰性標本所取得的,此規定值是陰性標本的上限。ELISA檢測試劑盒或者以一組陰性標本OD平均值加2~3個(gè)標準差作為陽(yáng)性閾值。
                                 2.直接以OD值來(lái)表示,如0.4、0.7、1.2,OD值越大,陽(yáng)性反應越強,但此數值是在固定實(shí)驗條件下得到的結果,而且每次實(shí)驗都要有參考標本作對照。
                                 3.以終點(diǎn)滴度表示:將標本作連續稀釋?zhuān)瑉ui高稀釋度能出現陽(yáng)性反應者(即OD值仍大于陽(yáng)性閾值),即為該標本的滴度。
                                 4.以“比值"表示:求出被檢標本的OD值與一組陰性標本OD值的比值,例如為陰性標本的2倍或3倍,即為陽(yáng)性,比值小于2.1而大于1.5為可疑,<1.5為陰性。
                                  5.以“單位"來(lái)表示:在測定被檢標本的同時(shí),再測定一個(gè)含已知單位數的陽(yáng)性參考血清,用不同稀釋度作ELISA檢測試劑盒后,以OD值為縱坐標,單位數為橫坐標,畫(huà)出標準曲線(xiàn)。以后可根據被檢標本的OD值,從曲線(xiàn)上找出相應的單位數,再乘于血清的稀釋倍數,即可得出被檢標本的單位數。
                                  作試驗時(shí)的陰性參考血清不要顯色,否則會(huì )對結果判斷帶來(lái)困難,特別在目測時(shí),當陽(yáng)性標本OD值>2.0時(shí),應作適當稀釋后再作測定。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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