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                              干細胞分化命運的新理論
                              更新時(shí)間:2015-05-11   點(diǎn)擊次數:802次

                                 zui近,前列腺素E2作為臍帶血移植藥物,在不同器官中,前列腺素可能是細胞生長(cháng)的主要調控因子,知道它可以用于臍帶血移植,也能夠在肝臟中起作用,那么很可能前列腺素還能影響更多的其他器官。

                                  發(fā)現在干細胞分化形成內臟的區域中,前列腺素E2的含量存在一個(gè)梯度。當時(shí)已知藥物對斑馬魚(yú)胚胎進(jìn)行化學(xué)篩選,以尋找能夠令造血干細胞增多的化合物。發(fā)現前列腺素E2的效果,它是*被發(fā)現有此效果的分子。肝臟和胰腺來(lái)源于共同的內胚層前體細胞。

                              1 細菌的生長(cháng)狀態(tài):實(shí)驗中應密切注視細菌的生長(cháng)狀態(tài)和密度,盡量使用對數生長(cháng)期的細胞(一般通過(guò)檢測OD600來(lái)控制。DH5?菌株OD600為0.5時(shí)細胞密度是5×107/ml);

                              2 所有操作均應在無(wú)菌條件和冰上進(jìn)行;

                              3 經(jīng)CaCl2處理的細胞,在低溫條件下,一定的時(shí)間內轉化率隨時(shí)間的推移而增加,24小時(shí)達到zui高,之后轉化率再下降(這是由于總的活菌數隨時(shí)間延長(cháng)而減少造成的);

                              4 化合物及無(wú)機離子的影響:在Ca2 的基礎上聯(lián)合其他二價(jià)金屬離子(如Mn2 或Co2 )、DMSO或還原劑等物質(zhì)處理細菌,可使轉化效率大大提高(100-1000倍);

                              5 所使用的器皿必須干凈。跡量的去污劑或其它化學(xué)物質(zhì)的存在可能大大降低細菌的轉化效率;

                              6 質(zhì)粒的大小及構型的影響:用于轉化的應主要是超螺旋的DNA;顯示在這些負責肝臟/胰腺形成的干細胞上,存在著(zhù)特殊的細胞膜受體,這些受體可以檢測周?chē)那傲邢偎谽2含量,希望能夠將其用于誘導多能干細胞iPSC,控制它們向肝細胞或者胰腺細胞分化。iPSC是將對成熟細胞進(jìn)行重編程形成的,具有與干細胞類(lèi)似的特性,這樣的方案將能幫助治療那些需要移植肝細胞或者相關(guān)器官受損的患者。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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