應客戶(hù)們對年前產(chǎn)品預購的要求，今日開(kāi)始逐漸安排發(fā)貨，具體內容公司業(yè)務(wù)員會(huì )及時(shí)。新年的開(kāi)始中，公司技術(shù)專(zhuān)員為ELISA檢測試劑盒新手入門(mén)的使用技術(shù)報告做出一番整理，在這里分享給您，供參考。
◎ELISA方法原理
  1.雙抗體(原)夾心法：檢測抗原(體)的常見(jiàn)方法，應用針對抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價(jià)以上抗原，不能測 小分子半抗原)。
  2.間接法：檢測抗體的方法，利用酶標記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結合的抗體。
  3.競爭法：檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，結果如待測抗原含量越多，與固相抗體結合的酶標抗原就越少，顯色越淺，二者呈負相關(guān)。
◎操作注意
  ① 使用干凈的塑料容器配置洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  ② 洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
  ③ 底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
◎ELISA試劑盒質(zhì)控分析
  1.人員培訓內容包括：①檢驗項目的基本原理(ELISA試劑盒原理)；②熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環(huán)節及難點(diǎn)；熟悉檢測試劑性能(包括試劑盒組成，包被片段及其組成)；③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數據處理的能力和質(zhì)量控制知識；④某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門(mén)組織的專(zhuān)門(mén)培訓班，考試合格后持證上崗。
  2.基本了解
    ① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應用于臨床檢驗發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
    ② 特點(diǎn)：ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"。
    ③ 酶標記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號放大；
    ④ 有二步溫育反應二次洗滌過(guò)程；
    ⑤ 靈敏度特異性相對較高。
    ⑥ 局限性：只能檢測到ng水平
    ⑦ 精密度差(批內CV15-20%)；
    ⑧ ELISA檢測試劑盒線(xiàn)性范圍窄(一個(gè)數量級)；
    ⑨ 存在"HD-HOOK"效應。