許多試劑檢測都涉及到標準曲線(xiàn)的問(wèn)題，ELISA試劑盒標準曲線(xiàn)做的好與壞會(huì )直接影響到實(shí)驗的結果，甚至是關(guān)系到實(shí)驗的成敗，那么究竟如何繪制或制作標準曲線(xiàn)呢？
一、做標準曲線(xiàn)樣品檢測時(shí)有幾個(gè)問(wèn)題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線(xiàn)計算出來(lái)的，所以首先要把做標準曲線(xiàn)看作是比做正式實(shí)驗還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗結果無(wú)從談起。
2、設置標準曲線(xiàn)樣品的標準濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實(shí)驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線(xiàn)濃度范圍之內，人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線(xiàn)，盡量要使實(shí)驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線(xiàn)幾乎成直線(xiàn)的范圍內。

3、采用倍比稀釋法配制標準曲線(xiàn)中的標準樣品濃度，ELISA試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會(huì )出現較大的偏離。
4、檢測標準樣品時(shí)，應按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線(xiàn)的樣品數一般為7個(gè)點(diǎn)，但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
6、做出的標準曲線(xiàn)相關(guān)系數因實(shí)驗要求不同而有所變動(dòng)，但一般來(lái)說(shuō)，相關(guān)系數R至少要大于0.98，對于有些實(shí)驗，至少要0.99甚至是0.999.
二、選擇什么方程去擬合
在S曲線(xiàn)的低濃度部門(mén)可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門(mén)可以用直線(xiàn)方程，中間部門(mén)可用對數方程，而中后段可用四參數。免疫檢測時(shí)尺度點(diǎn)（可以是倍比稀釋的，也可以不是）濃度假如和相應的吸光度（OD）值假如能夠呈現直線(xiàn)關(guān)系當然是的了，這時(shí)可以通過(guò)EXELL等利便的獲得擬合曲線(xiàn)，進(jìn)而推算出樣品的濃度值。 
關(guān)于尺度曲線(xiàn)的擬合方式，直線(xiàn)、二次曲線(xiàn)、三次曲線(xiàn)、指數、對數等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應中的曲線(xiàn)擬合，但都只合用于曲線(xiàn)的一部門(mén)，有的合用于前半段，有的合用于后半段，有的合用于中間一段，而Logistic曲線(xiàn)則對曲線(xiàn)的全部都有較好的合用性。在一個(gè)長(cháng)的區間內，Logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來(lái)定量，S形曲線(xiàn)的中間段（較陡處）是比較好的，而兩真個(gè)平坦部門(mén)計算誤差會(huì )大，有時(shí)甚至會(huì )很大。用于免疫檢測的所謂“尺度曲線(xiàn)”實(shí)在稱(chēng)為擬合曲線(xiàn)比較合適。目前上zui流行的免疫檢測擬合方式是“四參數邏輯擬合”，用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線(xiàn)關(guān)系，從而進(jìn)一步比較準確的獲得樣品中待測物質(zhì)的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況，標品濃度和相應OD值往往是"S"型的曲線(xiàn)關(guān)系，這時(shí)就不能用直線(xiàn)擬合的方式了，而對擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。ELISA試劑盒樞紐在于你的尺度曲線(xiàn)做到了S形的哪一部門(mén)，你想檢測的樣品濃度在曲線(xiàn)的哪一部門(mén)。人ELISA試劑盒當然，假如用于定量，仍是在中間一段較好。但建模型是一回事，而用它來(lái)定量是另一回事。這些方法固然沒(méi)有一種方法可以通用，但也都可以用。但并不是說(shuō)它就是的。事實(shí)上不僅是ELISA，其它良多生物學(xué)反應都是S形曲線(xiàn)，也都可以用Logistic曲線(xiàn)擬合。