ELISA試劑盒室內質(zhì)量控制程序
臨床檢驗的檢測結果，每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍，以臨床上不造成誤診與漏診為準，通過(guò)以下步驟來(lái)確定質(zhì)控范圍。
1） *條件下的測定誤差。
2） 已知值的血清在常規檢驗條件下的誤差。
3） 未知值的血清在常規檢驗條件下的誤差。
4） 臨床應用的要求。對任何一個(gè)試驗都應確定一個(gè)允許的誤差范圍，前題是滿(mǎn)足臨床要求。如允許誤差定得過(guò)小，在臨床上不存在任何意義，但為了符合該規定卻要花費很大人力、物力和時(shí)間。相反，如果將允許誤差定得過(guò)大，將使監測系統察覺(jué)不到臨床上要求檢出的誤差，失去質(zhì)控的意義。

1 *條件下已知值質(zhì)控血清變異（optimal conditions variance,簡(jiǎn)稱(chēng)OCV）的測定
在本實(shí)驗室*條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測質(zhì)控血清20-30次，測得結果計算，求出該組數據的均值和標準差（SD）表示該實(shí)驗室的*工作質(zhì)量。
現舉例說(shuō)明HBsAg ELISA法檢測時(shí)OCV的測定。使用的質(zhì)控制血清為臨界血清，HBsAg濃度為5ng/ml。在該實(shí)驗室中選擇素質(zhì)、操作zui熟練的技術(shù)員進(jìn)行認真地專(zhuān)門(mén)測定，選用*的試劑盒，檢測之前，將恒箱、加樣器等認真校正、調校正、調試，使用新的加樣吸頭等，即在*、的條件下進(jìn)行檢測。除質(zhì)控血清外同時(shí)測定陰性對照品和陽(yáng)性對照品。并作雙份測定，得出2個(gè)吸光值（A值），求出X。連續作20次，求出20個(gè)X，即X1……X20。從這20個(gè)數據中，求出OCV的X和SD。

2常規條件下已知值質(zhì)控血清變異（routine conditions variance-known value,簡(jiǎn)稱(chēng)　　RCVK）的測定。
做常規檢驗的技術(shù)人員，在常規檢驗的條件下，將質(zhì)控血清放在常規檢測樣本中，進(jìn)行20次檢驗，結果計算同OCV法。一般認為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內可以接受。
若太大應該查找原因，使其向OCV的SD值靠近。在改進(jìn)實(shí)驗室條件后（例如較正加樣器，糾正洗板操作，調正溫育溫度等），重新進(jìn)行RCVK的測定。如果RCVK的SD值更小，說(shuō)明OCV不是*條件下測定的，應重新再測OCV。常規條件下，RCVK肯定要比OCV大。通過(guò)質(zhì)控控制各項條件，使RCVK的數據盡可能接近OCV值。RCVK的數據反映該實(shí)驗室日常工作的質(zhì)量，用于作質(zhì)控圖，對室內檢驗的結果進(jìn)行控制，每日檢驗的結果，報告能否發(fā)出。

3常規條件下,未知值質(zhì)控血清變異（routine conditions variancl-unknown value 簡(jiǎn)稱(chēng)　　RCVU）的測定
有時(shí)為了避免主觀(guān)性,再作RCVU測定。
測定步驟同RCVK，但檢測的操作者不知質(zhì)控血清的定值，或在操作者不知哪份是質(zhì)控血汪清的條件下進(jìn)行常規檢驗，以排除操作者的主觀(guān)性。在此不再舉例說(shuō)明。

4質(zhì)控圖
通過(guò)以上三步驟，可以開(kāi)始作室內質(zhì)控圖，根據RCVK的和SD作質(zhì)控框圖。利用質(zhì)控圖可以對每次檢驗的結果進(jìn)行監測，當沒(méi)有更換另一批號試劑盒和另一批號質(zhì)控血清時(shí)，該質(zhì)控圖可以連續作下去。
 ELISA試劑盒質(zhì)控血清的S/CO值低于-2SD的范圍,屬"告警"，應尋找原因并在質(zhì)控圖上記錄查出的原因。

　　ELISA試驗中，各種檢驗項目的誤差允許范圍均有待在實(shí)踐中得出結論，以上只是舉例說(shuō)明質(zhì)控方法，不是定論。2SD是一般*的允許誤差限度。每批測定放一份質(zhì)控血清時(shí)，一次超過(guò)2SD應作為"告警"，二次超出2SD為"失控"。當質(zhì)控過(guò)程中，出現失控時(shí)，出現失控時(shí)，應查找原因，通常是試劑盒或質(zhì)控血清失效造成。更換試劑盒或更換質(zhì)控血
清，找出原因糾正后重新檢驗。如果檢驗結果仍達不到要求或找不到原 因時(shí)，應重復進(jìn)行OCV的檢驗。如果OCV檢驗的結果仍是好的，說(shuō)明常規操作出現問(wèn)題。
一般認為：①一次超出3SD；②連續二次超出2SD；③3-5次連續處于一側的2SD之內；　　　　?、?～7次連續偏向橫軸的一側，均為失控。
第③、④種情況，單獨依靠記錄往往是不易察覺(jué)的，但在質(zhì)控圖上可以清晰地發(fā)現這種失控。

5統計學(xué)計算方法--"即刻性"質(zhì)控
以上介紹的質(zhì)控方法基本上與臨床化學(xué)測定的質(zhì)控方法相同，但ELISA有其特殊性，zui合適的質(zhì)控方法尚待研究建立。有些實(shí)驗室不是每天進(jìn)行ELISA項目的檢驗，而ELSIA試劑盒效期短，用一批號試劑盒連續常規測20次，難度較大。采用"即刻法"質(zhì)控統計方法，只需連續測3次，即可對第3次檢驗結果進(jìn)行質(zhì)控。
"即刻法"的建立具體計算方法如下：
1）先將測定值從小到大排列
2）計算X和SD。
3）計算SDI上限和SDI下限值。
4）將SDI上限、SDI下限值與SDI值中的數字比較。當SDI上限值和SDI下限值＜n2SD時(shí)，表　示處于控制范圍內，可以繼續往下測定，繼續重復以上各項計算；當SDI上限和SDI下限有 一值處于n2SD和n2SD值之間時(shí)，說(shuō)明該值在2SD~3SD范圍，處于"告警"狀態(tài)；當SDI上限和SDI下限有一值＞n2SD時(shí)，說(shuō)明該值已在3SD范圍之外，屬"失控"。數值處于"告警"和"失控"狀態(tài)應舍去，重新測定該項質(zhì)控血清和病人樣本。舍去的只是失控的這次數值，其他次測定值仍可繼續使用。
即刻性質(zhì)控統計方法，適于ELISA測定的質(zhì)控。
 ELISA試劑盒當檢測的數值超過(guò)20次以后，不必再使用"即刻法"質(zhì)控統計計算，可以轉入常規的質(zhì)控圖的質(zhì)控。將前20次的數值求出的和SD作質(zhì)控框架圖，第21次的數值，依次點(diǎn)入即可。