ELISPOT法來(lái)源于ELISA，相比較傳統的ELISA法有所突破，是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同，使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合，傳統的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）不能確切的反映體內的抗體及CK的水平。80年代，國外的科研工作者根據ELISA技術(shù)的基本原理，建立了體外檢測特異性抗體分泌細胞和CK分泌細胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ELISPOT）。

         ELISPOT的起源可以追溯到1963年Jerne等人創(chuàng )立的溶血空斑技術(shù)（hemo-lytic plaque forming cell assay ，HPF），這項技術(shù)可用于檢測并計數單個(gè)抗體形成細胞。隨著(zhù)單克隆抗體技術(shù)的成熟，1983年，Czerkinsky等采用此法檢測脾細胞中分泌特異性抗體的細胞數，發(fā)現該方法敏感性高簡(jiǎn)便易行。后來(lái)，他們又用這種方法定量分析受到有絲分裂原刺激的外周血中分泌IFN2γ的細胞數。隨后，用ELISPOT法在單細胞水平檢測分泌其他細胞因子（如IL-2 ， IL-4 ， IL-5 ， IL-10 ， TNFα和IL-6） 數量的手段也被建立起來(lái)。Nordstrom 等用生物素-抗生物素蛋白生物放大法來(lái)提高這種方法的敏感性，Herr用計算機輔助圖像分析系統（computer-assisted video image analysis ，CVIA） 自動(dòng)分析TNF2α酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)的大小和數量，計算與負載抗原肽的靶細胞接觸后外周血單核細胞（PBMC） 中抗原特異性CD8+T細胞的數量，不但提高了對背景染色的分辨力也使大規模研究成為可能。Vaquerano等將數碼相機和計算機結合起來(lái)，開(kāi)發(fā)出類(lèi)似的斑點(diǎn)計數系統，認為當每孔斑點(diǎn)數大于100時(shí)，這種方法更客觀(guān)、可重復性高且節省時(shí)間。

        隨著(zhù)ELISPOT技術(shù)的不斷發(fā)展，它的優(yōu)勢也漸漸顯示出來(lái)，下面將ELISPOT與ELISA法對比區分。

        ELISA 通過(guò)顯色反應，在酶標儀上測定吸光度，與標準曲線(xiàn)比較得出可溶性蛋白總量。

        ELISPOT 也是通過(guò)顯色反應，在細胞分泌這種可溶性蛋白的相應位置上顯現清晰可辨的斑點(diǎn)，可直接在顯微鏡下人工計數斑點(diǎn)或通過(guò)計算機輔助的分析系統對斑點(diǎn)進(jìn)行計數， 1個(gè)斑點(diǎn)代表1個(gè)細胞，從而計算出分泌該蛋白的細胞的頻率。（某些研究不僅要測細胞因子生成量，還需檢測分泌此細胞因子的細胞頻率）
由于是單細胞水平檢測，ELISPOT比ELISA更靈敏，能從20萬(wàn)-30萬(wàn)細胞中檢出1個(gè)分泌該蛋白的細胞。

        捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內毒素的單抗，在研究者以刺激劑激活細胞時(shí)，不會(huì )影響活化細胞分泌細胞因子。

        目前ELISA法仍在研究當中占有著(zhù)主流地位，ELISA試劑盒的普遍應用使得實(shí)驗更加方便、經(jīng)濟和準確，ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展潛力。