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                              ELISA質(zhì)量管理--儀器質(zhì)控
                              更新時(shí)間:2013-09-17   點(diǎn)擊次數:1017次

                                      為使儀器保持*工作狀態(tài)應建立維護和校正儀器的標準操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍?zhuān)?,水浴箱(溫箱),洗板機和酶標儀。
                                      ◎移液器:ELISA加樣量?。?-100ul),其準確性直接影響實(shí)驗結果,利用稱(chēng)重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬(wàn)分之一天平稱(chēng)重后計算吸量是否準確,一般應在±10%以?xún)龋?br />◎水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中(或溫箱內)實(shí)測溫度是否一致,允許有±1℃的誤差;
                                      ◎洗板機 每個(gè)廠(chǎng)家設置洗板后的殘留液有各自的規定一般不超過(guò)2ul ,人工扣板時(shí),墊紙不濕,定期檢查管孔是否堵塞;
                              ◎酶標儀 經(jīng)常維護其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。

                              附1:酶標儀校正程序
                              ◎濾光片波長(cháng)精度檢查:將不同波長(cháng)的濾光片從酶標儀上卸下,用UV-2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(波長(cháng)精度±0.3nm)于可見(jiàn)光區對每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描,其檢測值與標定值之差為濾光片波長(cháng)精度。
                              ◎通噵差與孔間差檢測:通道差檢測是取一只酶標板小孔杯(杯底須光滑,透明,無(wú)污染以酶標板架作載體, 將其(內含200ul甲基橙溶液吸光度調至0.500A左右)置于8個(gè)通道的相應位置,蒸溜水調零,1于490nm處連續測三次,觀(guān)察其不同通道的檢測器測量結果的一致性,可用極差值來(lái)表示??组g差的測量是選擇同一廠(chǎng)家,同一批號酶標2板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調至0.100A左右)先后置于同一通道,蒸溜水調零,于490nm處檢測,其誤差大小用±1.96s衡量。
                              n 零點(diǎn)飄移(穩定性觀(guān)察):取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應位置,均加入200ul蒸溜水并調零,于490nm處每隔30分鐘測一次,觀(guān)察各個(gè)通道4小時(shí)內吸光度的變化。

                              ◎精密度評價(jià):每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同.濃度的甲基橙溶解,蒸溜水調零,于490nm作雙份平行測定,每日測二次(上下午各一次),連續測定20天。分別計算其批內精密度,日內批精密度,日間精密度和總精密度及相應的CV值。
                              ◎線(xiàn)性測定:用電子天平稱(chēng)取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液,于490nm平行測8次,取其均值。計算其回歸方程,相關(guān)系數及標準估計誤差s,并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長(cháng)測定評價(jià):取一分甲基橙溶液,分別加入3種不同濃度的溶血液(測定波長(cháng)為490nm,校正波長(cháng)為585nm),先后于8個(gè)通道檢測,每個(gè)通道測3次,比較各組之間是否具有統計學(xué)差異,以考察雙波長(cháng)消除干擾組分的效果。
                              ◎一般酶標儀無(wú)585nm濾光片,可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液(校正波長(cháng)為630nm)

                              上海通蔚生物科技有限公司

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