細胞活化︰ 

1.收到細胞株包裹時(shí)，請檢查細胞株冷凍管是否有凍結情形，若有請當即告訴。細胞株請盡速開(kāi)始培育，或當即冷凍保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。 

冷凍細胞凍結程序: 

1. 根據細胞株數據單zhi定之基礎培育基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它zhi定之成份和份額，制備培育基。絕大多數之細胞均無(wú)法當即適應不同之基礎培育基或不同之血清種類(lèi)，若因試驗需要，有必要有所不同時(shí)，必須以緩慢份額漸次改變培育基組成，確定細胞適應后，方進(jìn)行所需之試驗。 

2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請必須根據細胞株資料單zhi定之血清種類(lèi)培育之。 

3. 將培育基置于37 °C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺內。取出冷凍管，當即放入37 °C 水槽中快速凍結，水面高度不行接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易產(chǎn)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內悉數融化后，以70%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺。

4. 根據細胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺內取10 ml培育基加至T25 或T75 flask中。取出已凍結之細胞懸浮液，慢慢參加T25或T75 flask 內之培育基，混合均勻，放入37 °C，5 % CO2培育箱培育。 

5. 對絕大多數細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會(huì )對細胞之貼附或活化有不良影響，不需馬上由凍結.細胞中去除，待第二天確定細胞成長(cháng)或貼附良好后再去除即可。

 惟對極少數因對DMSO 靈敏或會(huì )形成細胞分化之細胞，需當即去除DMSO 者，則可將凍結后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培育基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，參加適量新鮮培育基，將細胞均勻混合后，轉移至培育瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培育箱培育。

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