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                              ELISA試劑盒與tunnel試劑盒的區別
                              更新時(shí)間:2015-09-29   點(diǎn)擊次數:2890次

                              Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。


                              tunnel試劑盒即為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法。
                              原理:細胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3’末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3’末端,從而可進(jìn)行凋亡細胞的檢測。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒(méi)有DNA的斷裂,因而沒(méi)有3’末端形成,很少能夠被染色。

                              TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結合的研究方法,對完整的單個(gè)凋亡細胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態(tài)測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用.

                              ELISA檢測試劑盒應用定性?shī)A心免疫檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì )與HEV的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結合物就會(huì )與*次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì )發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會(huì )發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長(cháng):450nm處測量O.D.值,按照本HEVIgM抗體elisa試劑盒的測試標準,O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽(yáng)性。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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