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                              ELISA試劑盒和酶聯(lián)免疫吸附測定
                              更新時(shí)間:2015-07-02   點(diǎn)擊次數:1961次

                                  從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進(jìn)行比較,*選擇活化酯法合成的BSA-SM/b作為免疫抗原,通過(guò)雜交瘤技術(shù)獲得1株能不亂分泌抗鏈霉素特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞株5C10。通過(guò)實(shí)驗比較了5種樣品處理方法,ELISA試劑盒選擇用Careez法處理并4倍稀釋后用于測定。為探索一種能夠快速有效的檢測牛奶中鏈霉素殘留的方法,本研究采用單克隆抗體技術(shù)等技術(shù),合工抗原,制備出抗鏈霉素單克隆抗體,建立了檢測牛奶中SM殘留的ELISA測定法,組建成鏈霉素快速檢測ELISA試劑盒并進(jìn)行了優(yōu)化和實(shí)際應用。

                                  作為一種敏捷、快速、特異性強的方法,酶聯(lián)免疫吸附測定法正逐漸應用于藥物的殘留檢測,海內外已經(jīng)建立了多種檢測牛奶中鏈霉素賤留的理化檢測方法,固然有些方法比較敏捷、,但因為方法復雜、耗時(shí)長(cháng)、花費大、技術(shù)要求高等原因而不適合大批量樣品的篩選。制備的腹水效價(jià)為1∶1280000,蛋白濃度為26.2mg/ml,與其他抗菌藥物的交叉反應率均低于0.1%。尺度曲線(xiàn)的批內變異系數為11.87%,均勻批間變異系數為8.017%。建立ELISA試劑盒尺度曲線(xiàn)的線(xiàn)性方程為y=1.8061-0.4932x(線(xiàn)性范圍25~2500ng/ml),其LOD為8.11ng/ml,低于劃定的牛奶中鏈霉素zui低殘留*200ng/ml。然而不規范用藥會(huì )引起畜禽產(chǎn)品尤其是泌乳動(dòng)物乳汁中的藥物殘留,對人類(lèi)的健康構成潛伏危害。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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