可用作ELISA檢測試劑盒測定的標本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定，其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進(jìn)行測定，有些則需經(jīng)預處理。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標本。
    在ELISA檢測試劑盒中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時(shí)會(huì )釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色。 
    血清標本宜在新鮮時(shí)檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA檢測試劑盒中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過(guò)一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩?；鞚峄蛴谐恋淼难鍢吮緫入x心或過(guò)濾，澄清后再檢測。反復凍融會(huì )使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應注意無(wú)菌操作，也可加入適當防腐劑。