此時(shí)可用特定的波長(cháng)（450nm）測讀吸光值。酶標比色儀簡(jiǎn)稱(chēng)酶標儀，通常指于測讀ELISA試劑盒研發(fā)結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有：測讀速度、讀數的準確性、重復性、度和可測范圍、線(xiàn)性等等。優(yōu)良的酶標儀的讀數一般可到0.001，準確性為±1%，重復性達0.5%。酶標儀不應安置在陽(yáng)光或強光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30℃，使用前先預熱儀器15-30 分鐘，測讀結果更穩定。
    測讀A 值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD 用492nm 波長(cháng)。有的酶標儀可用雙波長(cháng)式測讀，即每孔先后測讀兩次，*次在zui適波長(cháng)（W1），第二次在不敏感波長(cháng)（W2），兩次測定間不 移動(dòng)ELISA試劑盒研發(fā)板的位置，zui終測得的A 值為兩者之差（W1-W2）。雙波長(cháng)式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質(zhì)的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結合，并借助于親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質(zhì)回復到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗。
    洗板時(shí)注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋?zhuān)瑧匆笙♂專(zhuān)玫乃妼试?.5us/cm 之下，洗液如果結晶應待其融解后配制。保證洗板浸泡時(shí)間為40 秒左右，孔內液體被洗板機吸收得越干凈洗滌效果更好，手工洗板防止洗液在孔內形成氣泡。

    洗滌在ELISA試劑盒研發(fā)過(guò)程中雖不是一個(gè)反應步驟，但卻決定著(zhù)實(shí)驗的成敗。ELISA試劑盒研發(fā)就是靠洗滌來(lái)達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結合的物質(zhì)，以及在反應過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)應把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)?？梢哉f(shuō)在ELISA試劑盒研發(fā)操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。