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                              人ELISA試劑盒的操作技巧
                              更新時(shí)間:2015-05-14   點(diǎn)擊次數:2644次

                                  掌握了實(shí)驗技巧之后,人ELISA試劑盒實(shí)驗入門(mén)新手學(xué)起來(lái)都會(huì )快的多。本篇文章中的小竅門(mén)包含了要求、方法等技術(shù),為大家整理出了這些個(gè)人ELISA試劑盒小竅門(mén):

                              1.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

                              2.合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。

                              3.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

                              4.要盡量做雙孔實(shí)驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

                              5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。

                              6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

                              7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。

                              8.ELISA試劑盒實(shí)驗中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗*。

                              9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

                              10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

                              11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。

                              12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

                              13.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。

                              14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。

                              15.在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

                              16.吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

                              17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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