因此培養在有膠原的底物上可能利于生長(cháng),另外人或小鼠表皮在以3T3細胞為飼養層(用射線(xiàn)照射后)時(shí),細胞易生長(cháng)并可發(fā)生一定程度的分化現象。降低PH、Ca2 含量和溫度,向培養基中加入表皮生長(cháng)因子,均有利于表皮細胞生長(cháng)。
以表皮細胞為例,用皮膚表皮和分離培養法可獲得純上皮細胞,方法如下:
1、 取材:外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊,早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好,去角化層薄者,切成0.5-1平方厘米小塊。
2、置0.02%EDTA中,室溫,5分鐘。
3、換入0.25%胰蛋白酶中,4攝氏度過(guò)夜。
4、分離:取出皮塊,用血管鉗或鑷子將表皮與層分開(kāi)。
5、取出表皮,剪成更小的塊后,置0.25&胰酶中,37攝氏度,30-60分鐘。
6、反復吹打,制成懸液。
7、培養:用80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過(guò)后,低速離心,吸去上清。
8、直接加入培養基細胞懸液,接種入培養瓶,CO2溫箱培養。主要的客戶(hù)是醫學(xué)院校,做實(shí)行面向的種屬重要是人,大鼠和小鼠,如今市面市情上雞、牛、馬、羊、兔種種指標的盒子都有售,真不知道這些抗體是怎么來(lái)的。據我所相識,這些炎癥指標依然有很大種屬特異性的。
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