方面一:檢驗技師應具備從事實(shí)驗室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗。能熟練操作實(shí)驗儀器、器械,具有一定總結和分析問(wèn)題的能力,對ELISA試劑盒實(shí)驗中出現的意外情況能及時(shí)妥善解決。
方面二使用校對過(guò)的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
方面三:仔細閱讀說(shuō)明書(shū)嚴格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復試驗確定成立后才能改進(jìn)。
方面四:洗滌*
洗板不*,酶結合物本底顯色會(huì )呈現假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會(huì )出現本底增高現象,也可能出現假陽(yáng)性。
方面五:嚴控反應時(shí)間
反應時(shí)間過(guò)長(cháng),酶失活;反應時(shí)間過(guò)短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
方面六
注意ELISA試劑盒保存期,過(guò)保存期的試劑不能使用。
方面七:評估試劑的實(shí)用性
試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進(jìn)行陰、陽(yáng)對照及樣品反復比照試驗。
顯色時(shí)間過(guò)短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過(guò)少,易出現假陰性。超過(guò)顯色要求時(shí)間后顯色,應判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽(yáng)性,這可能是本底顯色的結果。
方面九:加樣要準確、快速
如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應慎重。要求在一定時(shí)間內加樣完畢的實(shí)驗,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且ELISA試劑盒試劑長(cháng)時(shí)間暴露在外,尤其室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì )縮短甚至失效。
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