ELISA試劑盒技術(shù)原理：以免疫學(xué)反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底

1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。

2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。

3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。

4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體，也通過(guò)反應而結合在固相載體上。

5. 此時(shí)固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

6. 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量 與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據呈色的深淺進(jìn)行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），并且重復性好。

ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過(guò)程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻進(jìn)行，ELISA試劑盒提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.