1. 產(chǎn)品有哪幾種規格?可檢測多少個(gè)樣本?
ELISA試劑盒產(chǎn)品分為48T和96T兩種規格。
每次實(shí)驗的標準曲線(xiàn)一般設7個(gè)不同濃度,加上空白孔,標準曲線(xiàn)一共需要8個(gè)孔。因此,一個(gè)48T試劑盒zui多可以測定40個(gè)樣本(不做重復且一次用完),一個(gè)96T試劑盒zui多可以測定88個(gè)樣本(不做重復且一次用完)??梢愿鶕?shí)際樣本數量和實(shí)驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規格。
2.48T和96T的試劑盒有哪些不同?
48T和96T的試劑盒,每個(gè)孔的反應體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規格,詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。
3. 產(chǎn)品的穩定性如何?
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過(guò)嚴格的穩定測試,發(fā)貨前亦須通過(guò)檢測并提供質(zhì)檢報告,在市場(chǎng)上深受廣大客戶(hù)的贊許!
4.貴公司有沒(méi)有酶活性檢測的試劑盒?
酶活力的測定實(shí)際上就是測定酶促反應的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來(lái)表示,單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法:⑴測定完成一定量反應所需的時(shí)間,⑵測定單位時(shí)間內酶催化化學(xué)反應量。主要通過(guò)產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來(lái)測定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵熒光法,⑶同位素測定法,⑷電化學(xué)法。
ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進(jìn)行定性和定量的檢測,所以酶活性是不能用ELISA來(lái)檢測的。
5.一次ELISA試劑盒實(shí)驗需要多長(cháng)時(shí)間?
雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗需要4-4.5小時(shí),競爭ELISA法一次實(shí)驗需要2-2.5小時(shí)。
6.血清樣本如何處理?
全血標本于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
7. 血漿樣本如何處理?
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
8. 尿液樣本如何處理?
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
9.細胞上清液樣本如何處理?
檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
10. ELISA試劑盒組織樣本如何處理?
用預冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據實(shí)驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測。
11.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法?
小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定,可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結合位點(diǎn),標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的生物素化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
12.用什么軟件處理ELISA檢測的數據比較好?
ELISA標準曲線(xiàn)擬合可以應用Curve Expert軟件進(jìn)行數據分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲線(xiàn)應用到論文之中。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載。
13. 試劑盒做的結果不理想怎么辦?
實(shí)驗結果不理想請及時(shí)與客服或,我們可以幫您一起分析實(shí)驗結果。如果僅憑實(shí)驗數據無(wú)法判斷,您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問(wèn)題,可以為您退換貨;如果是實(shí)驗操作的問(wèn)題,技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。
14.使用Elabscience ELISA Kit發(fā)表論文有獎勵嗎?
如果您使用我公司的ELISA Kit且已發(fā)表論文,可以獲得500~2000元獎學(xué)金或代金券,具體獎勵政策請咨詢(xún)銷(xiāo)售人員。
15.怎樣處理elisa實(shí)驗結果?
1.ELISA實(shí)驗中樣品都要做復孔或三孔,然后計算每個(gè)濃度標準品的平均OD值,復孔的變異系數應該小于20%。
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
3.ELISA試劑盒制作標準曲線(xiàn)。
以減去本底后的OD值為X軸,標準品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線(xiàn)、半對數、對數、四參數方程等)并從中選擇一條zui合適的方程。要想檢驗某條曲線(xiàn)是否與表中數據吻合,可以將標準品的濃度作為未知數,將對應的OD值帶入該方程,計算出標準品的濃度,得到的結果應該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度zui高的那條曲線(xiàn)。
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