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                              ELISA試劑盒實(shí)驗“花板”問(wèn)題分析
                              更新時(shí)間:2014-08-06   點(diǎn)擊次數:918次

                                  ELISA試劑盒結果“花板”的問(wèn)題對檢測數據造成了很大影響,往往會(huì )使檢測者做出誤判,是實(shí)驗中必須要注意和避免的。

                              使用ELISA試劑盒對血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等實(shí)驗檢測的結果中,空白和陰性,陽(yáng)性對照以及室內質(zhì)控孔結果正常,根據衛生部臨檢中心提供的數據,HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常范圍均為2NCU,但血液標本孔的OD值比較高(大多數OD值≥0.070)。標本的陽(yáng)性率很高,每板除對照孔外,有時(shí)陽(yáng)性高達10孔之多,而大多數真陽(yáng)性標本都出現弱陽(yáng)性結果。

                              針對這種“花板”現象我們通過(guò)多次實(shí)驗的分析和判斷,總結了一些經(jīng)驗,分析如下:

                               

                              1 標本、試劑、儀器

                              1.1 標本 出入境人員的血液標本。

                              1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠(chǎng)家的ELISA試劑盒。

                              1.3 儀器 LD4-2型腦心機BID RAD1575型洗板機BID RAD550酶標儀。

                               

                              2 方法

                              所有被檢出入境人員的血液標本,按照各個(gè)廠(chǎng)家提供的ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行HBsAg-HCV-HIV梅毒等檢驗項目操作。所有試劑均在有效期內使用。

                               

                              3 結果

                              所使用不同廠(chǎng)家的試劑有時(shí)會(huì )出現“花板”問(wèn)題。

                               

                              4 分析

                              在所有標本進(jìn)行檢測的過(guò)程中,所用的儀器及加樣過(guò)程都處于正常狀態(tài)的情況下,步驟均按照各種試劑說(shuō)明書(shū)的要求去做,排除實(shí)驗所用儀器和操作步驟對實(shí)驗結果的影響外,ELISA試劑盒內的空白、陰性和陽(yáng)性對照以及室內質(zhì)控值都很正常,只有檢測的血液標本情況異常。根據國家和疾控中心報告陽(yáng)性率的比例不應該是很高的情況下,HBsAg在用ELISA之前都經(jīng)過(guò)了快速金標試劑的檢測,陽(yáng)性標本得到了一定的控制。因此,原因可能是在標本的處理,特別是放置時(shí)間、離心速度和離心時(shí)間方面的問(wèn)題。所以,標本的處理就成為實(shí)驗結果的主要可疑因素。

                              為了避免“花板”現象的出現,降低檢測的假陽(yáng)性率,獲取準確的實(shí)驗結果,應選擇靈敏度高、特異性好、穩定性好、批間差小、操作方便省時(shí)的ELISA試劑。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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