本試劑僅供研究使用  標本：體液

試驗原理：

S100-β試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（ELISA）.已知S100-β濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進(jìn)行檢測。先將S100-β和生物素標記的抗體同時(shí)溫育。ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中S100-β的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． ELISA檢測試劑盒不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

1． 試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。

2． 實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7． 底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。

9． 按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋?xiě)趯?shí)驗時(shí)準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

1． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個(gè)標準品和空白孔建議做復孔。每個(gè)樣品根據自己的數量來(lái)定，能使用復孔的盡量做復孔。

3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

4． 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。

9． 在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

局限

6號標準品以上的結果為非線(xiàn)性的，根據此標準曲線(xiàn)無(wú)法得到的結果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長(cháng)450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），ELISA檢測試劑盒相應的S100-β標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線(xiàn)，樣品的S100-β含量可根據其OD值由標準曲線(xiàn)換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-40ng/ml

4、敏感度： 0.1 ng/ml

L-Selectin/CD62L ELISA Kit  小鼠L選擇素 X17969  96T
Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit  豚鼠卵清蛋白特異性IgG X17970  96T
ACV-RAb（Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb ）ELISA Kit  大鼠活化素A受體抗體 X17971  96T
IL-1 Beta （Rabbit Interleukin 1 Beta） ELISA Kit  兔白介素1β X17972  96T
PCDH1（ Human protocadherin 1,PCDH1 ）ELISA Kit  人原鈣黏素1 X17973  96T
CK-MB（Rat Creatine Kinase MB isoenzyme） ELISA Kit  大鼠肌酸激酶同工酶MB ELISA Kit X17974  96T
SCT（Salmon calcitonin） ELISA Kit  鮭魚(yú)降鈣素 X17975  96T
IL-6 （Rabbit Interleukin 6） ELISA Kit  兔白介素6 X17976  96T
Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit   豚鼠白介素4 X17977  96T
NGB（Rat Neuroglobin,NGB） ELISA Kit  大鼠腦紅蛋白 X17978  96T
PCDH1（Human Interleukin-2 receptor,IL-2R） ELISA Kit  人原鈣黏素1 X17979  96T
Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit  小鼠粘蛋白/粘液素5B X17980  96T
IL-10 （Rabbit Interleukin 10） ELISA Kit  兔白介素10 X17981  96T
CTACK/CCL27（Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK） ELISA Kit  人皮膚T細胞虜獲趨化因子 X17982  96T
Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit  豚鼠免疫球蛋白G X17983  96T
TPO（Rat Thrombopoietin,TPO ）ELISA kit  大鼠血小板生成素 X17984  96T
Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 X17985  96T
IFN- Gamma ELISA Kit（mouse）   小鼠γ干擾素 X17986  96T
FSH Poultry ELISA Kit  FSH 禽類(lèi)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17987  96T
LH Poultry ELISA Kit   LH 禽類(lèi)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17988  96T
PRL Poultry ELISA Kit  PRL 禽類(lèi)酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17989  96T
E2 ELISA KIT  魚(yú)雌二醇 X17990  96T