ELISA試劑盒嚴格按照實(shí)驗步驟進(jìn)行ELISA實(shí)驗,得出試驗數據,就需要處理計算數據,做出擬合曲線(xiàn),計算濃度了??梢越栌脤?zhuān)業(yè)制作曲線(xiàn)軟件進(jìn)行分析,如curve expert 1.3,根據樣品的OD值由標準曲線(xiàn)查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線(xiàn)的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,ELISA試劑盒計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實(shí)際濃度。
這里就介紹一下運用ELISA試劑盒EXCEL進(jìn)行計算的方法,你只要雙擊圖表,把它輸入到圖表的數據中,就可以擬和曲線(xiàn)。根據曲線(xiàn)方程式,計算出濃度。
方法:
1、擬和曲線(xiàn):
輸入*行: 濃度值, 如0 10 50 100 400
輸入第二行:該濃度下的調整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
選擇這些輸入的數據,用插入里的圖表按鈕,進(jìn)入圖表向導,在“標準類(lèi)型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”;在“子圖表類(lèi)型”中選擇“折線(xiàn)散點(diǎn)圖”,按“下一步”;選擇“系列產(chǎn)生在行”,按“下一步”;數據標志,可以填寫(xiě):如數據y軸,OD值;數據x軸,濃度;按下一步,點(diǎn)擊完成??傻们€(xiàn)圖。
單擊曲線(xiàn),按右鍵,選擇“添加趨勢線(xiàn)”,ELISA試劑盒在類(lèi)型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說(shuō)的方法: 雙擊圖表,把它輸入到圖表的數據中,就可以擬和曲線(xiàn)。
2、計算濃度:
*次實(shí)驗:
標準曲線(xiàn)為:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
為例,ELISA試劑盒已知OD值,計算濃度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0
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