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                              FAME全自動(dòng)酶免分析對人ELISA試劑盒檢測系統因素分析
                              更新時(shí)間:2013-10-28   點(diǎn)擊次數:841次

                                      在全自動(dòng)加樣儀的加樣高度設置中,不斷增加加樣高度,觀(guān)察FAME對4個(gè)質(zhì)控血清平行孑L的檢測效果。加樣高度設置對檢測結果的影響:在A(yíng)T plus 2容器參數編纂過(guò)程中,丈量酶標板的孔徑和高度,并進(jìn)行加樣定位,確保12根一次性加樣針均在對應微孔的中心。因此,有必要對FAME洗液桶進(jìn)行適當的水浴預溫,使洗液溫度達到18℃后再用于檢測,人ELISA試劑盒對保證FAME檢測結果的正確性起重要作用。但經(jīng)進(jìn)一步研究后發(fā)現,洗液在較低溫度下(小于14℃),FAME的洗板*減弱,陰性樣本的檢測曲線(xiàn)變寬,嚴峻脂血樣本可能會(huì )泛起假陽(yáng)性。觀(guān)察檢測結果是否有假陰性及原始OD值的變異系數(CV)。在不同溫度的FAME洗液下,對88份正常的無(wú)償獻血者血樣進(jìn)行4個(gè)項目檢測,觀(guān)察不同溫度的洗液對檢測結果的影響。樣本選用88份正常的*抗凝的無(wú)償獻血者血樣,為降低因試劑造成的誤差,4個(gè)項目在不同洗液溫度下的檢測均采用統一批號的試劑,于2周內完成。

                                      樣本抗凝方法對檢測結果的影響:將88份無(wú)償獻血者血樣隨機分為兩組,對照組和實(shí)驗組各44份,對照組血樣(m1)和肝素(u)的比例為1:10,實(shí)驗組血樣(m1)和肝素(U)的比例為1:2.室溫下,兩組血樣經(jīng)3 000 r/min離心5 min后均有較好的分層,血漿呈液態(tài),肉眼觀(guān)察兩組血樣無(wú)區別。近年來(lái),良多采供血機構接踵引進(jìn)了全自動(dòng)酶免分析系統用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA試劑盒)檢測,全自動(dòng)酶免檢測設備在過(guò)程處理的速度、正確性精密度和重復性方面均優(yōu)于手工操縱。分別在HBsAg、抗一HCV、抗一HIV和TP等4項ELISA檢測項目的酶標板上設空缺對照2孔、陰性對照3孔、陽(yáng)性對照2孑L、質(zhì)控1孔,其余88孔用于兩組血樣的檢測。方法隨機選擇對照組和實(shí)驗組各44份無(wú)償獻血者血樣,分別進(jìn)行兩種不同方式的抗凝,應用FAME全自動(dòng)酶免分析系統進(jìn)行HBsAg、抗一HCV、抗一HIV、TP 4個(gè)項目檢測,比較兩組檢測結果。
                                      在嚴寒的冬季,當實(shí)驗室溫度低于14℃時(shí),即使采取了升溫措施,使實(shí)驗室溫度很快達到預定的室溫,但洗液溫度的上升會(huì )存在嚴峻的滯后現象。洗液溫度對檢測結果的影響:用10℃蒸餾水對濃縮洗滌液進(jìn)行20倍稀釋?zhuān)浞只靹?,?溶解后加入FAME洗液桶,人ELISA試劑盒并用37℃水浴箱分別對其水浴加熱至14℃、18℃、22℃ 、26℃后用于檢測。探討3種常見(jiàn)的影響全自動(dòng)酶免分析系統檢測結果的因素,進(jìn)步ELISA試劑盒檢測結果的正確性。在加樣程序編纂中,加樣步驟及加樣體積按試劑仿單要求進(jìn)行,加樣高度在軟件缺省值(8.1 mm)的基礎上分別增加0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mm。

                                          恰當的洗滌液溫度對保證FAME的洗板效果及檢測結果的重復性有重要意義。在無(wú)償獻血者標本中,經(jīng)常會(huì )有較多的不同程度的脂血樣本,一般以為溶血、脂血樣本對ELISA 檢測結果影響不大L3 。若檢測結果為陽(yáng)性,重新取樣后用相同試劑雙孔復測,人ELISA試劑盒若雙孔均為陰性,則確定原檢測結果為假陽(yáng)性。檢測樣本用4個(gè)室內質(zhì)控血清替換,各項試驗平行檢測2孔,對照用手工加樣,保證CUT OFF值計算正確。

                              上海通蔚生物科技有限公司

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