本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫學(xué)診斷
人（Human）干擾素誘導T細胞趨化因子（ITAC/CXCL11）ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預
先包被干擾素誘導T細胞趨化因子（ITAC/CXCL11）抗體的包被微孔中，
依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。
用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的
作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的干擾素誘導T細胞
趨化因子（ITAC/CXCL11）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定
吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細胞
刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地
分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘
取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于
-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的
濃縮洗滌液會(huì )有結晶，這屬于正?，F象，水浴加熱使結晶*溶解
后再使用。2. 實(shí)驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說(shuō)明
書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5 倍，zui終結果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴格按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱(chēng)96孔配置48孔配置備注
微孔酶標板12 孔×8 條12 孔×4 條無(wú)
標準品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無(wú)
樣本稀釋液6mL 3mL 無(wú)
檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú)
20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
底物A 6mL 3mL 無(wú)
底物B 6mL 3mL 無(wú)
終止液6mL 3mL 無(wú)
封板膜2 張2 張無(wú)
說(shuō)明書(shū)1 份1 份無(wú)
自封袋1 個(gè)1 個(gè)無(wú)
注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、150、300、600、1200、2400 pg/mL
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1：20 稀釋?zhuān)? 份的20×洗滌緩
沖液加19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min 后甩盡
孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5 次。
2. 自動(dòng)洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5 次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封
袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不
加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶
（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴
鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5 次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min 內，在450nm 波長(cháng)處測定各孔的
OD 值。
結果判斷
繪制標準曲線(xiàn)：在Excel 工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應
OD 值作縱坐標，繪制出標準品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn)，按曲線(xiàn)方程計算各樣
本濃度值。
ELISA試劑盒試劑盒性能
1. 準確性：標準品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數R 值，大于等于
0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結構類(lèi)似物交叉反應。
4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 個(gè)月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗或人體實(shí)驗，否則所
產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說(shuō)明書(shū)操作，實(shí)驗者違反說(shuō)明書(shū)操作，后果由實(shí)驗者
承擔。