上海通蔚實(shí)生物兔TXA2 ELISA試劑盒簡(jiǎn)介

自體活性物質(zhì)之一，在體內由脫羧基而成，組織中的組胺是以無(wú)活性的結合型存在于肥大細胞和嗜堿性粒細胞的顆粒中，皮膚、支氣管粘膜、腸粘膜和神經(jīng)系統中含量較多。當機體受到理化刺激或發(fā)生過(guò)敏反應時(shí)，可引起這些細胞脫顆粒，導致組胺釋放，與組胺受體結合而產(chǎn)生.生物效應?？菇M胺是拮抗組胺對兔體的.生物效應，即應用抗組胺藥物?？菇M胺受體就是拮抗組胺的H1和H2受體。由于此兩種受體在兔體內分布不同而產(chǎn)生不同的效應，它是抗組胺藥應用治療疾病的生理藥理基礎。

兔TXA2 ELISA試劑盒實(shí)驗條件選擇

在ELISA中，進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

(1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應，觀(guān)察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗條件相同時(shí)，觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1～10μg/ml。

(3)酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗系統里準確地滴定其工作濃度。

(4)酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿(mǎn)意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

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