為了保證ELISA試劑盒試驗的穩定及順利完成,下面通蔚生物給大家講解使用洗板機洗板時(shí)應注意以下三個(gè)步驟。
1、洗滌參數
主要的參數是洗滌量。自動(dòng)洗板機會(huì )分配洗滌液。如果你之前遭遇過(guò)高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調為高,比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì )讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。
ELISA試劑盒的使用手冊中列出包被量。我們建議使用350µl洗滌液進(jìn)行洗滌,以便清潔整個(gè)反應孔的壁。一般來(lái)說(shuō),洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
2、抽 吸
還有一些參數會(huì )影響洗滌步驟的效果。這些參數包括吸液高度和吸入位置,這兩者都能調整,以降低背景(殘留量)和差異。
殘留液體中包含未結合的抗原或抗體,它們會(huì )增加背景信號。殘留量越小,殘留液體越少,轉移到下一步的干擾液體也就越少。
吸液高度會(huì )明顯影響殘留量;如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大,那就會(huì )讓殘留量急劇增加。反之,如果洗滌吸頭壓著(zhù)反應孔底部,那么也會(huì )使吸液效率降低,殘留量增加。
3、洗滌次數
影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環(huán)的量。當然,洗滌次數越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會(huì )降低信號強度,使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過(guò),一般而言,包被平板需要的洗滌次數比用戶(hù)包被的平板要少。對于用戶(hù)包被的ELISA板,必須優(yōu)化洗滌次數。
控制洗滌量和洗滌次數的另一種方法是加入過(guò)量的洗滌液。一般來(lái)說(shuō),96孔板的每個(gè)孔能容納330至460 µl。不過(guò),有些自動(dòng)化洗板機可設置程序,分配遠遠超出這個(gè)量的洗滌液,比如1 ml。它是如何做到的呢?其實(shí)很簡(jiǎn)單,就是在分液的同時(shí)打開(kāi)吸液功能。換句話(huà)說(shuō),隨著(zhù)分液器分配更多的液體,抽吸器也將液體吸出。這種技術(shù)能增加洗滌量,但不會(huì )溢出到其他孔中。
以上是通蔚生物ELISA試劑盒試驗洗板機洗板的具體步驟有那些,希望可以幫助大家。上海通蔚生物倉鼠elisa試劑盒一路走來(lái)依靠豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準確的交貨時(shí)間、競爭力的價(jià)格的優(yōu)勢等獲得各大學(xué)院機構的支持和信任。我們在日后不論是銷(xiāo)售部門(mén)、技術(shù)部門(mén)還是行政部門(mén)都要不斷壯大,虛心學(xué)習,集思廣益,事無(wú)具細的為客戶(hù)所想,急客戶(hù)所急。讓客戶(hù)滿(mǎn)意,才是我們永恒的追求!
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