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                              通蔚生物淺析探針?lè )≒CR檢測試劑盒的原理有哪些
                              更新時(shí)間:2023-09-22   點(diǎn)擊次數:675次

                              探針?lè )≒CR檢測試劑盒的原理在于PCR擴增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個(gè)報告熒光基團和一個(gè)淬滅熒光基團。探針完整時(shí),報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收。剛開(kāi)始時(shí),探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時(shí),Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成同步。


                              常用于熒光免疫法中標記抗原或抗體,亦可用于微環(huán)境,如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質(zhì)活性位點(diǎn)等處微觀(guān)特性的探測。通常要求探針的摩爾吸光系數大,熒光量子產(chǎn)率高;熒光發(fā)射波長(cháng)處于長(cháng)波且有較大的斯托克斯位移;用于免疫分析時(shí),與抗原或抗體的結合不應影響它們的活性。


                              目前常用的熒光探針有熒光素類(lèi)探針、無(wú)機離子熒光探針、熒光量子點(diǎn)、分子信標等。熒光探針除應用于核酸和蛋白質(zhì)的定量分析外,在核酸染色、DNA電泳、核酸分子雜交、定量PCR技術(shù)以及DNA測序上都有著(zhù)廣泛的應用。


                              探針?lè )≒CR檢測試劑盒設備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分析速度快及靈敏度高?;瘜W(xué)發(fā)光成像分析是將化學(xué)發(fā)光與成像技術(shù)相結合,從而具有分辨率高、多樣品同時(shí)檢測、光譜響應范圍寬以及靈敏度高等特點(diǎn),已廣泛應用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學(xué)發(fā)光信號檢測。


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