ELISA試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準確度。
比如水中總無(wú)機氯含量測定,樣品水中含有無(wú)機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機氯標準樣品,測定時(shí)忽略體積變化,如果測定出樣品中無(wú)機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。
下面談?wù)凟LISA試劑盒的運用過(guò)程:
1.ELISA試劑盒用于檢測的樣品應保持新鮮.
2.用戶(hù)在初度運用試劑盒時(shí),應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底.
3.每次試驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4.丈量時(shí)先用此孔調OD值至零.
4.要確保微量加樣器的確性,能夠運用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(因為蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水能夠看作是lg 200 L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定.
5.因為底物顯色劑對光及其靈敏,因此要避光保存.
6.手藝洗板時(shí)每次參加洗滌液后.應靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干.
7.檢測吸光度前應將酶標儀翻開(kāi),將其預熱30min以上.
8.底物為T(mén)MB,防止與皮膚相觸摸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應盡量防止觸摸皮膚.
9.孵育的時(shí)間應該嚴格依照試劑盒說(shuō)明書(shū)上的時(shí)間為準.
10.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要運用其他檢測方法進(jìn)行驗證.
11.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),能夠運用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿運用自來(lái)水.
12.在運用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標準品溶液.
13.汲取液體時(shí)速度不易太快,以免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠準確.
14.將液體加到酶標孔中時(shí),防止槍頭和孔內液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會(huì )自然流下去.吸入液體時(shí)的方法是吸兩檔打一檔,防止因為槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差.
15.汲取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差.
16.試驗前30min將試劑盒中的一切試劑從冰箱取出,使試劑盒中的一切試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只需取出所需量.
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