試劑盒被廣泛應用于各種抗原和抗體測定,但測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過(guò)程中除正常反應外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯誤的結果,引起測定錯誤結果的原因主要有:
(1)試劑盒因素
(2)標本因素
(3)操作因素
試劑盒需要注意的事項是:
1. 在做完整的實(shí)驗過(guò)儀器之前,儀器預熱半小時(shí),這個(gè)計算好時(shí)間,也可以直接將儀器一直開(kāi)著(zhù),直到整個(gè)實(shí)驗結束。
2. 在加液過(guò)程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,
3. 但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體看整體多少量,不要吹打下去,特別忌諱在版孔內壁流向版孔,整個(gè)加液過(guò)程不要產(chǎn)生氣泡(洗滌液除外)。
試劑盒標準曲線(xiàn)做不好的原因分析:
A、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯,顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。
B、酶濃度太高,導致zui后顯色結果都是高的。
C、包被:酶標系統不匹配或者酶標的非特異反應太強,或者酶標儀讀數范圍不夠。
D、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì),沒(méi)洗下來(lái)。
建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優(yōu)化靈敏度,zui后調出所需的靈敏度、線(xiàn)性范圍。
建議:有條件的話(huà),可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數。
建議:蛋白系統靈敏度夠的話(huà),顯色十分鐘就差不多了。
建議:酶是自己標的這種情況的,HRP比例不要太高。
以上是有關(guān)試劑盒標準曲線(xiàn)做不好有哪些原因。上海通蔚生物公司將進(jìn)一步加強人才培養、產(chǎn)品創(chuàng )新,持續不斷地提升企業(yè)核心竟爭力,實(shí)現具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng )業(yè)團隊的化大集團企業(yè),更好、更快捷、更*的服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來(lái)的機遇與挑戰。
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