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                              酶聯(lián)免疫試劑盒的標準曲線(xiàn)如何繪制?看這里!
                              更新時(shí)間:2023-03-02   點(diǎn)擊次數:744次
                                在動(dòng)物檢疫方面,酶聯(lián)免疫試劑盒在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標準方法。
                                
                                用于標記的酶用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產(chǎn)物易于顯現;能商品化生產(chǎn)。目前應用較多的有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用廣。
                                
                                許多試劑檢測都涉及到標準曲線(xiàn)的問(wèn)題,標準曲線(xiàn)做的好與壞會(huì )直接影響到實(shí)驗的結果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗的成敗,那么究竟如何繪制或制作標準曲線(xiàn)呢?
                                
                                小編就具體為您講解下酶聯(lián)免疫試劑盒標準曲線(xiàn)的繪制要點(diǎn):
                                
                                標準曲線(xiàn)樣品檢測時(shí)有幾個(gè)問(wèn)題需要注意:
                                
                                1、樣品的濃度等指標是根據標準曲線(xiàn)計算出來(lái)的,所以首先要把做標準曲線(xiàn)看作是比做正式實(shí)驗還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗結果無(wú)從談起。
                                
                                2、設置標準曲線(xiàn)樣品的標準濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實(shí)驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線(xiàn)濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線(xiàn),盡量要使實(shí)驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線(xiàn)幾乎成直線(xiàn)的范圍內。
                                
                                3、采用倍比稀釋法配制標準曲線(xiàn)中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會(huì )出現較大的偏離。
                                
                                4、檢測標準樣品時(shí),應按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
                                
                                5、標準曲線(xiàn)的樣品數一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
                                
                                6、做出的標準曲線(xiàn)相關(guān)系數因實(shí)驗要求不同而有所變動(dòng),但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數R至少要大于0.98,對于有些實(shí)驗,至少要0.99甚至是0.999。
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