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                              上海通蔚生物豬ELISA試劑盒試驗注意事項有哪些
                              更新時(shí)間:2022-05-10   點(diǎn)擊次數:1668次

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                              在ELISA實(shí)驗前的注意事項

                              1、仔細閱讀說(shuō)明書(shū)

                              2、確定試劑盒在有效期內

                              3、按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數量、體積)

                              4、標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個(gè)復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無(wú)法實(shí)驗者,注意低溫保存

                              5、準備好所有實(shí)驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等

                              6、根據檢測標本數量確定所需試劑的量

                              7、按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑


                              ELISA試驗時(shí),注意事項如下:

                              1.正式試驗時(shí),應分別以陽(yáng)性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實(shí)驗結果的準確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

                              2.在ELISA中,進(jìn)行各項實(shí)驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

                              (1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗條件下進(jìn)行反應,觀(guān)察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。

                              (2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時(shí),觀(guān)察陽(yáng)性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為1~10μg/ml。

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                              上海通蔚生物科技有限公司

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