看看我司是怎樣把細胞系養的更好,不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個(gè)不僅僅是說(shuō)培養基的不同,還有就是細胞生長(cháng)的空間密度問(wèn)題。有一些細胞是數量多一點(diǎn)比較好生長(cháng),生長(cháng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(cháng)速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點(diǎn)細胞狀態(tài)會(huì )生長(cháng)的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。
尤其是巨噬細胞,生長(cháng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會(huì )比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長(cháng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(cháng)成相連在一起的一滿(mǎn)片的時(shí)候,細胞形態(tài)基本上就會(huì )差了,老化的會(huì )比較多,對后期實(shí)驗結果是不好的。所以在養細胞的時(shí)候應該摸索該細胞喜歡的生長(cháng)空間密度問(wèn)題。
對于有些人總是會(huì )遇到養的細胞形態(tài)怎么都不好的問(wèn)題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:
首先,倒掉舊的培養基,加入 3 ml 新的培養基(有無(wú)血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入 3 ml 的培養基,進(jìn)行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著(zhù)瓶底過(guò)一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開(kāi)始正式的消化、吹打。
其次,把吹打下來(lái)的細胞懸液加入到新的培養瓶?jì)?,培養瓶事先加入培養基,放入培養箱內培養,按時(shí)間點(diǎn)觀(guān)察細胞貼壁情況。10 分鐘觀(guān)察一次,20 分鐘,30 分鐘觀(guān)察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養基,加入 3 ml 新培養基再輕輕洗一次。然后加入*培養基培養。后續觀(guān)察細胞生長(cháng)情況以及形態(tài)。
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